Lymphocytes (phénotypage des Lymphocytes CD4 et CD8

Les lymphocytes comprennent

• les lymphocytes B, issus de la moelle osseuse et dont la fonction principale est de sécréter des anticorps ;

• les lymphocytes T, issus eux aussi de la moelle mais passés par le thymus, et chargés principalement de la destruction des cellules.

Les lymphocytes portent à leur surface des molécules membranai­res susceptibles d’être reconnues par des anticorps spécifiques. Ces antigènes de surface (ce sont des antigènes puisqu’ils sont détec­tés par des anticorps) sont détectés par des anticorps monoclonaux spécifiques. Ils sont appelés CD (pour cluster of differenciation) et sont numérotés. Ils permettent de classer les lymphocytes en T et B, et à l’intérieur de ces deux groupes, en plusieurs sous-populations. Dans le sang normal la population lymphocytaire T est majoritaire (75 % des lymphocytes), exprimant toujours l’antigène CD3. Les lymphocytes T se répartissent en deux sous populations : lympho­cytes T amplificateurs de la réponse immune (ou helpers) portant l’antigène CD4, lymphocytes T suppresseurs (ou killers) portant l’antigène CD8.

Les lymphocytes B sont reconnus grâce à leurs antigènes communs dits Pan B (CD19 et CD20). D’autres antigènes caractérisent des sous- populations B (CD21 et CD22) ou des lymphocytes B activés (CD23).

Indications

• Diagnostic des leucémies et lymphomes chroniques de type B sur­tout en complément de l’analyse morphologique.

• Suivi des patients infectés par le VIH.

Prélèvement

Sang veineux sur anticoagulant.

Moelle osseuse prélevée par ponction sternale.

Méthode

Après lyse des globules rouges, les différentes populations lympho­cytaires sont marquées par des anticorps monoclonaux liés à un fluorochrome. Les cellules fluorescentes sont ensuite comptées en cytométrie en flux (CMF). Les appareils actuels permettent d’analy­ser plusieurs marqueurs à la fois, de cibler l’analyse sur des cellules de taille et de morphologie définies.

Valeurs usuelles

• Lymphocytes T (CD3) :

60 à 80 % des lymphocytes circulants (1 000 à 3 000/mm³)

• lymphocytes T4 (CD4) :

2/3 des lymphocytes T

40 à 50 % des lymphocytes circulants (plus de 1 500/mm³)

• lymphocytes T8 (CD8) :

1/3 des lymphocytes T

20 à 30 % des lymphocytes (moins de 1 000/mm³)

• Lymphocytes B (CD19) :

10 à 15 % des lymphocytes (200 à 500/mm³)

Les résultats sont mieux exprimés en valeur absolue afin de tenir compte des variations de la numération lymphocytaire.

Se méfier de possibles variations au cours du nycthémère (faire les prélèvements aux mêmes heures) ou d’un jour à l’autre (ne pas hési­ter à refaire la mesure).

Interprétation

Déficits immunitaires

Un important déficit en lymphocytes B et IgG s’observe dans l’agam­maglobulinémie liée à l’X (maladie de Bruton) caractérisée par des infections à répétition après la première année.

Des déficits en cellules T s’observent dans des déficits immuni­taires congénitaux comme le syndrome de DiGeorge (absence de thymus, malformations cardiaques, dysmorphies faciales) ou l’ataxie-télangiectasie (déficit immunitaire mixte sévère portant sur­tout sur l’immunité humorale et ataxie cérébelleuse progressive).

Leucémies

Parmi les leucémies aiguës lymphoblastiques (LAL), celles de type B (développées à partir de blastes B) expriment généralement les antigènes CD19, CD22, et l’antigène CALLA (CD10) de surface. Elles peuvent être guéries chez l’enfant dans 80 % des cas.

En revanche, les LAL de type T expriment les antigènes CD3, CD5 et CD7, diversement associés. Elles ont un pronostic plus favorable que les LAL de type B chez l’adulte, alors que c’est l’inverse chez l’enfant de plus d’un an.

Dans les leucémies lymphoïdes chroniques, la population lympho­cytaire B exprime des antigènes CD19 et CD20 ainsi que des mar­queurs inhabituels (CD5, CD23).

Infection à VI

Le VIH a pour cible les lymphocytes T4. Il les pénètre, s’y développe et finalement les fait éclater avant de se répandre dans le sang. L’infection se caractérise donc par une diminution progressive des cellules CD4.

Lorsque les lymphocytes T4 < 300/mm³, la possibilité de développer un sida dans les deux ans est de 80 %.

Le nombre de CD4 est corrélé avec l’apparition des infections oppor­tunistes. C’est ainsi qu’apparaissent :

• la tuberculose et le sarcome de Kaposi entre 500 et 200 CD4/pJ ;
• la pneumocystose entre 200 et 100 CD4/^l ;
• la toxoplasmose cérébrale au-dessous de 100 CD4/pJ ;
• les infections à cytomégalovirus (CMV), les mycobactérioses et la leuco-encéphalopathie multifocale progressive (LEMP) au-dessous de 50 CD4/gl.

Quelques marqueurs des lymphocytes

Antigènes	Cellules
CD24	Lymphocytes B
CD20	Cellules pré-B et lymphocytes B
CD19	Lymphocytes B
CD10	Précurseurs B
CD8	Lymphocytes T
CD4	Lymphocytes T
CD2	Cellules T

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